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SwinePoxvirus猪痘病毒荧光定量PCR检测试剂盒 - 尊龙凯时时刻关注生物医疗创新

发布时间:2025-07-30   信息来源:尊龙凯时官方编辑

### 产品特点

SwinePoxvirus猪痘病毒荧光定量PCR检测试剂盒 - 尊龙凯时时刻关注生物医疗创新

本产品是根据探针法荧光定量PCR原理开发的检测试剂盒,具有以下优势:

  1. 即开即用,用户只需提供样品DNA模板。
  2. 经过优化的引物等组分,确保高灵敏度。
  3. 提供阳性对照,方便识别假阴性样品。
  4. 引物设计基于中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区,具有良好的特异性,不会与其它生物样本的DNA发生交叉反应。
  5. 适用于定性及定量检测,在定量检测时,线性范围至少为5个数量级。
  6. 本产品足以支持50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
  7. 仅供科研使用。

### 使用方法

#### 一、DNA提取(样本制备区)

使用自选方法提取和纯化样品DNA,本试剂盒与市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。

#### 二、稀释标准曲线样品(样本制备区)

由于阳性对照浓度较高,建议在独立区域进行以下稀释操作,避免样品或本试剂盒其他成分的污染:

  1. 标记6个离心管,分别命名为7,6,5,4,3,2。
  2. 使用带芯枪头,向每个管中加入45μL DEPC-H2O。
  3. 在7号管中加入5μL 1×10E8拷贝/μL的阳性对照,充分震荡1分钟,得到1×10E7拷贝/μL的标准曲线样品,存放于冰上待用。
  4. 更换枪头,在6号管中加入5μL 1×10E7拷贝/μL的阳性对照,充分震荡1分钟,得到1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品,存放于冰上待用。
  5. 重复上述操作直至获得6个不同稀释度的标准曲线样品,存放于冰上待用。
  6. 若无需制作标准曲线,将阳性对照稀释至1×10E5拷贝/μL即可。

#### 三、试剂配制(试剂准备区)

若有N个待检样品,准备N+2个qPCR管(N个待检样品+1个阴性对照+6个阳性对照),向各PCR管中分别加入相应成分(详见说明书,欢迎咨询尊龙凯时人生就博)。

#### 四、添加模板(模板添加区)

向qPCR管中分别加入2μL模板,先加阴性对照(DEPC-H2O),然后为待测样品模板,最后为婴儿利什曼虫qPCR阳性对照,离心30秒,立即进行扩增反应。

#### 五、扩增反应(扩增及产物分析区)

将PCR管放置于PCR扩增仪器的样品槽中,进行扩增,详细扩增程序请参考说明书(可向尊龙凯时人生就博咨询)。

### 结果分析

  1. 如果制作标准曲线,则以阳性对照浓度的log值为横轴,以Ct值为纵轴,绘制标准曲线,并基于待测样品的Ct值从标准曲线上推算出样品DNA浓度的log值。
  2. 如果未制作标准曲线,按照以下标准判断结果:
    • 阳性对照结果:Ct值<30,有明显的指数增长,呈现典型的S型曲线。
    • 阴性对照结果:Ct值为38或无Ct值,无明显指数增长期和平台期。
    • 样本检测结果:Ct值<35,有明显指数增长,表明样本中检出了婴儿利什曼虫,结果为阳性;Ct值为38或无Ct值则表示样本中未检测到婴儿利什曼虫,结果为阴性;若Ct值在35-38范围,应对样本进行复检,如重复实验结果Ct值仍在此范围并显示明显指数增长,则判定为阳性,反之则为阴性。

### 运输及保存

本产品需低温运输,保存于-20℃环境中,有效保存期限为一年。阳性对照需单独存放,避免污染其他试剂。